МР 4.2.0249-21. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Серологическая (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 20.05.2021)

1.2. МР разработаны с целью унифицирования использования РПГА при шигеллезе, вызванном Shigella sonnei и Shigella flexneri, сальмонеллезе, вызванном Salmonella серологических групп O2(A), O4(B), O7(C1), O8(C2-C3), O9(D1-D3), O3,10(E), и интерпретации результатов с учетом клинической выраженности заболевания и активности эпидемического процесса на конкретной территории.

1.3. МР предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы научными и медицинскими организациями, осуществляющими серологическую диагностику острых кишечных инфекций (далее - ОКИ).

2.1. Диагнозы шигеллез и сальмонеллез, включая брюшной тиф и паратифы, определяются на основании клинических признаков заболевания с учетом эпидемиологического анамнеза и результатов комплексного лабораторного обследования с использованием бактериологического (культурального), молекулярно-генетического и серологического методов, соответствующих санитарно-эпидемиологическим требованиям <1> и методическим документам <2>. Бактериологическая диагностика имеет приоритетное значение, так как выделение возбудителя позволяет получить полную информацию о его фенотипических свойствах, включая чувствительность к антибиотикам.

--------------------------------

<1> СанПиН 3.3686-21 "Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней", утвержденные постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 28.01.2021 N 4 (зарегистрировано Минюстом 15.02.2021, регистрационный N 62500) (далее - СанПиН 3.3686-21).

<2> МУ 4.2.2723-10 "Лабораторная диагностика сальмонеллезов, обнаружение сальмонелл в пищевых продуктах и объектах окружающей среды", утвержденные Роспотребнадзором 13.08.2010 (далее - МУ 4.2.2723-10); методические рекомендации "Бактериологическая диагностика брюшного тифа и паратифов A, B и C", утвержденные Роспотребнадзором 29.12.2007 N 0100/13745-07-34.

2.2. Серологический метод диагностики шигеллеза, сальмонеллеза, брюшного тифа и паратифов является ретроспективным, регистрирует иммунный ответ макроорганизма на инфицирование возбудителем - появление специфических антител к O-антигенам Shigella и Salmonella и Vi-антигену возбудителя брюшного тифа и паратифа C. Диагностическое значение имеет определение в сыворотке крови инфицированных лиц количественного содержания (уровня) суммарных антител и IgG.

2.3. Серологическая диагностика способствует совершенствованию системы эпидемиологического надзора за ОКИ, так как количественная и качественная характеристика иммунного ответа на встречу с возбудителями позволяет диагностировать стертые и субклинические формы болезни, выявлять ранее переболевших, обеспечивает более полную и обоснованную информацию для оценки активности эпидемического процесса.

2.4. Серологический метод позволяет дифференцировать транзиторное носительство от субклинической формы брюшного тифа. При транзиторном носительстве отсутствует достоверный сдвиг в уровнях сывороточных антител. Наличие положительной динамики указывает на развитие патологического процесса, который может характеризоваться субклиническим течением.

В настоящее время более 60% ОКИ остаются бактериологически нерасшифрованными. Выявление антител и определение их класса может использоваться для оперативного эпидемиологического анализа в очагах ОКИ с целью уточнения фактической распространенности инфекции в коллективе и поиска источника. Быстрое и полное выявление всех инфицированных в очаге позволяет конкретизировать профилактические, противоэпидемические, лечебные мероприятия и способствует ликвидации очага.

--------------------------------

<3> Примечание: допускается использование средств измерений, вспомогательного оборудования и материалов с аналогичными или лучшими характеристиками; допускается использование других реактивов с аналогичными характеристиками.

3.1. Для проведения РПГА используют стандартное общелабораторное оборудование и материалы:

- термостат, позволяющий поддерживать рабочую температуру плюс 37 °C плюс/минус 1 °C;

- водяная баня или термостат, поддерживающие температуру плюс 56 °C плюс/минус 1 °C;

- холодильник, поддерживающий температуру от плюс 2 до плюс 8 °C;

- морозильная камера, поддерживающая температуру не выше минус 16 °C;

- центрифуга лабораторная, 2,5 - 3,0 тыс. оборотов в минуту;

- одноканальные дозаторы переменного объема с диапазоном объема доз от 20 до 1000 мкл;

- многоканальные дозаторы переменного объема, объем дозы 50 мкл;

- дозатор одноканальный для пошагового дозирования (по типу степпер), объем дозы 25 мкл;

- автоматический встряхиватель (шейкер) для пробирок;

- система для взятия крови по типу "Вакутейнер" (англ. Vacutainer) без наполнителя или с активатором свертывания;

- микропробирки на 1,5 - 2,0 мл (по типу "Эппендорф");

- стерильные пробирки (многоразового или однократного использования), объем 10 мл;

- планшеты круглодонные для иммунологических реакций однократного применения;

- одноразовые наконечники для дозаторов переменного объема от 20 мкл до 1000 мкл;

- емкость с дезинфицирующим раствором <4>.

--------------------------------

<4> Утилизация отходов проводится в соответствии с СанПиН 3.3686-21.

3.2. Наборы диагностикумов и реагенты, зарегистрированные и разрешенные для использования на территории Российской Федерации в установленном порядке <5>:

--------------------------------

<5> Пункт 4 статья 38 Федерального закона от 21.11.2011 N 323-ФЗ "Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации"; постановление Правительства Российской Федерации от 27.12.2012 N 1416 "Об утверждении Правил государственной регистрации медицинских изделий".

- эритроцитарные диагностикумы для постановки РПГА;

- редуценты: L-цистеин; унитиол 50 мг/мл (димеркаптоопропансульфонат натрия);

- стерильный физиологический раствор (0,9% раствор натрия хлорида), pH 7,2